• 

Investigadores del Instituto de Biotecnología y Biomedicina y del Departamento de Bioquímica y Biología Molecular de la Universitat Autònoma de Barcelona (UAB) han desarrollado y patentado un método con la levadura Saccharomyces cerevisiae para detectar, en proteínas humanas, la formación de pequeños grupos tóxicos de moléculas precursoras de las fibras amiloides implicadas en enfermedades neurodegenerativas.

El test permite validar también la eficacia de posibles compuestos que deshagan o inhiban estos agregados iniciales y estudiar la potencialidad terapéutica, a nivel básico, de un gran número de moléculas.

Los agregados iniciales están formados por entre 2 y 20 moléculas. Búsquedas recientes parecen indicar que su toxicidad es más elevada que la de las fibras amiloides, pero su estudio no resulta fácil, porque son inestables y su formación es transitoria.

El método desarrollado por investigadores de la UAB permite localizar y hacer un seguimiento del proceso de agregación de la proteína objeto de estudio in vivo, mediante técnicas de fluorescencia, sin tener que recurrir a métodos alternativos. El test permite también estudiar compuestos que inhiban estos agregados como un mecanismo potencialmente terapéutico, que evite la formación posterior de las placas amiloides.

El sistema de cribado se ha realizado modificando genéticamente la levadura Saccharomyces cerevisiae, para vincular la agregación de proteínas humanas a la muerte celular. Se basa en la fusión del péptido humano objeto de estudio con la variante humana de una proteína indispensable para la supervivencia de la levadura modificada, la dihidrofolato reductasa (DHFR). La agregación del péptido inactiva la proteína DHFR y acaba provocando la muerte de la célula, proporcionando un sistema de detección de moléculas con tendencia a agregar y en el que cualquier compuesto que deshaga o inhiba esta agregación favorecerá la supervivencia celular.

Los investigadores han llevado a cabo su investigación con el péptido AB42 humano, principal causante del Alzheimer. Para validar el test, han probado varios compuestos que, in vitro y en estudios sobre esta enfermedad, se habían mostrado efectivos contra la formación de agregados iniciales, de fibras amiloides o de ambos tipos de moléculas.

El sistema sólo se ha mostrado eficaz con los compuestos que afectan a los primeros, lo que lo hace muy específico para la detección automática del proceso de agregación. La validación del sistema se ha hecho también con chaperonas, un grupo de proteínas que aumentan la disolución de los agregados proteicos y favorecen la supervivencia de la célula. Además de la AB42, los investigadores también han validado el ensayo, en cuanto a la detección de los agregados iniciales, con proteínas humanas implicadas en Parkinson y Huntington.

Según Salvador Ventura, uno de los autores del trabajo, el sistema es fácil de utilizar, permite trabajar con rapidez y analizar de manera fiable la potencial eficacia terapéutica de un sinfín de compuestos en un primer nivel experimental. Sólo habría que automatizarlo mediante placas que permitan el análisis simultáneo de más de 50 moléculas por ensayo para la investigación básica.